简介

控制和根除猪肺炎支原体（M. hyo）的一个重要组成部分是对猪群中细菌脱落持续时间的评估，因其将决定引入后备母猪的时间，畜群隔离的持续时间。最重要的是，该信息将有助于制定更合理的后备母猪适应策略。尽管对实验感染猪的排毒时间进行了评估，但对自然感染的后备母猪的猪肺炎支原体的流行病学了解不多（Pieters 等，2009; Pieters 等，新闻）。本研究旨概述在自然感染的后备母猪群体中猪肺炎支原体的感染模式和持久性。

材料和实验方法

参与这项研究的猪场在保持5年以上的阴性后，在最近发生了猪肺炎支原体爆发。在该前瞻性队列研究中，随机选取63头21日龄后备母猪，标记并连续5周，每周采集喉拭子样本，随后每月采集样本。在第21，110和140日龄收集血清样本。最后一次采样发生在分娩阶段，从实验母猪和其所产的5头仔猪收集气管样本。由于感染中后期对喉部感染的敏感性较差，故决定从200日龄开始采集气管样本，（Fablet 等，2010）。将后颈人工授精（PCAI）棒的末端插入气管收集气管样本。收集样本后，将连接件从PCAI棒上取下并插入含有0.5毫升PBS的无菌卡扣试管中，并在4℃下冷藏。为了评估肺部感染，对20头实验小母猪实施人道安乐死，并进行全面病理检查。将所有喉，气管和肺部样本提交给爱荷华州立大学兽医诊断实验室，并通过定量猪肺炎支原体PCR进行测试，通过IDEXX ELISA测试血清样品的猪肺炎支原体抗体。

初步结果和讨论

在整个研究过程中，19头小母猪死亡，或者由于其不符合小母猪筛选标准而在研究的不同阶段被淘汰（图1）。断奶时，11％的小母猪感染，在284天后检测到最后的阳性母猪。尽管最近出现猪肺炎支原体爆发，但断奶流行率仍很低。据推测，较低的发病率可能是由于母猪饲喂抗生素，猪肺炎支原体菌株毒性较小或喉部检测方法缺乏敏感性。第80，110，140和170天的患病率分别为14.5％，29.7％，28.8％和4.2％。即使在爆发的情况下，这种传播速度慢，感染水平低也是猪肺炎支原体控制的最大挑战之一。

图1：母猪中猪肺炎支原体纵向检测热图

鉴于早期检测下降，决定采用更具侵入性和敏感性的诊断方法。使用喉头拭子和气管样本进行并排比较。在200日龄时，喉部拭子的猪肺炎支原体检出率为8.8％，而气管样品则为42.2％。在215日龄时，检测到5.2％的喉拭子PCR阳性，而气管样本则为52％。后一种取样方法似乎是慢性感染期间检测猪肺炎支原体的更敏感的方法（Pieters等人，出版中; Fablet等人，2010）。在第245，275，305，325和340日龄时，患病率分别降至33.3％，18.75％，5.80％，0％和0％。在该研究中，4头小母猪（6.3％）在整个研究期间保持PCR阴性；然而有证据显示到140天时100％的小母猪出现血清转化。这表明尽管本研究中93.4％的后备母猪至少一次喉或气管样本PCR阳性，但即使在连续取样后，并不是所有暴露的后备母猪都检测到阳性。在设计猪肺炎支原体取样策略时（如确定 “零”日龄，或在解除猪群隔离前检测），应考虑灵敏度的限制。最后，分娩时，20头实验母猪和其所产的5头断奶仔猪，均测试为PCR阴性。

21日龄时的血清阳性率为100％，表明母猪抗体转移给仔猪。 110天时的血清阳性率为59.5％。 在这些血清阳性的后备母猪中，39％的喉拭子为PCR阴性。通常在感染后4-8周可见血清转化，故这些结果表明喉拭子法在先前的样本中不能有效的检测感染。相反，在110日龄时，38％的小母猪为血清学阴性，其中27％的小母猪在21和49日龄间通过喉拭子检测为PCR阳性。这表明了猪肺炎支原体血清转化的可变性，且支持抗体应答是感染的滞后指标的事实。在140天时，血清阳性率表明100％的小母猪血清转化，在8次不同采样后，仍有30％的血清阳性后备母猪，通过喉拭子未能检测到PCR阳性。

215日龄时，对2头母猪进行尸检，对其肺部进行组织病理学检查，结果表明淋巴细胞性细支气管周炎，充血，原因不明的支气管肺炎（照片1）。 所有肺切片和气管样本PCR测试均为猪肺炎支原体阴性。在第245天和第275天，来自3头小母猪的肺样本未显示肺炎支原体疾病的眼观或组织病理学病变，且所有样本PCR测试均为阴性。然而，在安乐死之前收集的这些小母猪的气管样本的PCR测试则为阳性。后一种观察结果可能表明，与慢性感染期间的气管样本相比，用于检测肺炎支原体的支气管样本的敏感性可能较低。

照片1：流行性肺炎：眼观肺部病变。来源：病理学讲座，出自Pat Halbur

关键信息

1.即使猪肺炎支原体在最近传入阴性猪群的情况下，在分娩室内仔猪感染猪肺炎支原体和排毒的可能性也很低。

2.使用喉拭子，在49日龄时观察到急性感染高峰（39％）。在215天观察到慢性感染的峰值（52％）。

3.猪肺炎支原体在暴露的猪群中缓慢传播。即使在疫情爆发期间，阳性小母猪的比例也未曾超过52％。

4.284天时，检测到最后一次小母猪阳性。这为猪群可长时间排毒提供了进一步的证据。

5.在感染中后期，喉拭子似乎缺乏检测猪肺炎支原体的敏感性，由血清转化和喉拭子PCR阴性所证明。

6.与喉拭子相比，气管样本似乎是更为敏感的诊断工具。

7.猪肺炎支原体抗体反应是感染后的滞后指标。

原标题：当猪肺炎支原体传入猪群时会发生什么？对后备母猪自然感染的评估