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仔猪猪流行性腹泻病毒与大肠杆菌混合感染的诊治

日期:2023-05-10 10:44:06

摘要:仔猪腹泻现象在猪场时常发生,其主要传染性因素的病原分为病毒和细菌两类。猪流行性腹泻病毒是最主要的病毒病原,而大肠杆菌则是重要的细菌病原。当猪流行性腹泻病毒和大肠杆菌混合感染时,会给猪场造成严重的经济损失。本文通过一例仔猪猪流行性腹泻病毒和大肠杆菌混合感染的病例,从发病情况、剖检变化、实验室诊断、药敏试验、防治等方面进行阐述,旨在为临床上防控这两种疾病提供参考。

关键词:仔猪;猪流行性腹泻病毒;大肠杆菌;混合感染;诊治

引起仔猪腹泻的传染性因素有很多,主要分为病毒性病原和细菌性病原两类。常见的病毒性病原主要包括猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRoV)、猪细小病毒(PPV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)等,尤其肠道病毒感染仔猪后,临床症状表现相似、病理变化差别不大,容易引起误诊,耽误疾病的及时防治。在这些肠道病毒中,PEDV对哺乳仔猪的危害最重,发病率可达100%,病死率30%~80%。患病猪是PEDV的主要传染源,此外,携带PEDV的野猪是病毒的储存宿主,对该病的流行和传播具有重要作用。2010年起,我国的许多猪场大规模暴发PED,初生仔猪死亡率达90%以上,原来的免疫方式和疫苗不能控制PED发生,原因在于PEDV发生了重要变异。2013年5月,美国首次发现PED,传播力强,致使美国31个州的商品猪存栏量在18个月内损失10%。

细菌性病原主要为大肠杆菌(E.coli),随着养猪业规模迅速扩大,仔猪黄痢和仔猪白痢在临床上最常发生,其发病率和死亡率在仔猪疾病中占据首位,极大阻碍了养猪业的健康发展。由于E.coli血清型复杂,易产生耐药菌株,如何有效地防治该病正面临着巨大的挑战。

PEDV与E.coli是目前引起仔猪腹泻最主要的病原,当仔猪同时感染PEDV与E.coli时,会给养猪场造成严重的经济损失。现将一例仔猪PEDV与E.coli混合感染的情况报道如下。

1 发病情况

齐齐哈尔市泰来县某一体化养猪场共养殖生猪1300多头,2022年4月下旬,母猪与新生仔猪陆续发病,母猪主要表现为呕吐、喷射状水样腹泻,精神状态良好,食欲正常,持续1周后康复;哺乳仔猪出生后第2天,开始持续水样腹泻,后变为白色稀便,精神沉郁,食欲减退,3~5d后陆续出现死亡。畜主前期用过头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星及补液盐等药物,效果不佳,至来就诊咨询时,仔猪已陆续死亡25头。

2 剖检变化

对刚死亡的2头小猪进行剖检,肝脏局部坏死(见图1);肾脏有密密麻麻点状出血(见图2);脾脏 边缘出血、梗死(见图3);小肠壁变薄,肠系膜出血,肠内充满黄色液体(见图4)。      

3 实验室诊断

3.1病毒检测

1)病料处理 取脾脏、肾脏、脑、淋巴结等组织及肠内容物约2.0g,放于研磨中,剪碎,加入1mL生理盐水研磨,磨碎后放入EP管中,6000rpm离心3min。

2)RNA提取 取上清液按照相关说明进行DNA和RNA的提取,获得模板DNA和模板RNA。

3)PCR扩增 设计好程序,在PCR扩增仪上进行TGEV、PEDV、PRoV、CSFV、PRRSV、PRV的扩增。

4)电泳 取PCR或RT-PCR产物点样于琼脂糖凝胶孔中,以110V电压于TAE电泳缓冲液中进行16min的电泳,在凝胶成像系统上观察结果。第2泳道,在508bP左右处出现亮带,说明猪流行性腹泻病毒阳性,其余病毒阴性(见图5)。 

3.2 细菌检测

无菌取仔猪的肝脏、脾脏组织接种于琼脂培养基,通过麦康凯和伊红美蓝鉴别培养基、革兰氏染色及菌体形态,确定从仔猪体内分离的菌体为大肠杆菌。

4 药敏试验

将分离的菌均匀涂抹到营养琼脂平板上,选择6种常用抗菌药(头孢噻呋钠、庆大霉素、环丙沙星、多西环素、磺胺间甲氧嘧啶、卡那霉素)均匀放置于平板上,培养过夜。结果显示,该菌对卡那霉素中度敏感,对其它抗生素不敏感。

5 防治

5.1 消毒与隔离

将病猪转至隔离间,猪舍全面消毒,可选择次氯酸成分的消毒水(84)或者是3%的氢氧化钠溶液,对分娩舍清扫干净,用百毒杀进行彻底消毒后将临产母猪赶入待分娩。禁止工作人员来回窜舍,防止交叉传播病菌。

5.2 加强饲养管理

不同阶段的猪要进行分开饲养,哺乳仔猪和妊娠母猪更要进行单独饲养,避免PEDV的传播和交叉感染,饲喂全价料保障猪的生长发育,补给微量元素和维生素。

5.3 药物治疗

丁胺卡那霉素肌注,发病仔猪按10mg/kg体重给药,1次/d;白细胞干扰素2000~3000IU,皮下注射,1次/d,同时口服补液盐,饲喂乳酸杆菌,连用5d;全群用活性炭拌料,每100kg饲料加0.5kg活性炭,连喂3~5d。选用以黄连、黄芩为主药的多种中药方剂水煎服用。

5.4 血清治疗

用康复仔猪的血清给发病仔猪注射,1mL/头,连用4d。

6 讨论

PEDV主要侵染初生仔猪并致病,目前针对仔猪发病无有效的免疫治疗方法,必须依赖母猪初乳获得被动免疫进行疫病防控。因此,需要做好母猪的PED免疫。灭活疫苗免疫母猪可以产生较好的免疫效果,但肌肉或后海穴免疫途径主要产生执行体液免疫功能的IgG,执行肠道黏膜保护的IgA产生有限,因此保护不了仔猪感染PEDV,经典毒株和经典毒株CV777重组容易产生新型变异株,且存在生物安全风险;弱毒疫苗相对于灭活苗具有接种量少、抗体产生速度快等优势,但筛选疫苗毒株的周期过长;基因工程疫苗中的重组病毒可能存在过度致弱的问题。因此需要对包括母猪孕期免疫机理和PEDV免疫防控的诸多方面加强研究,为更加完善的PEDV免疫防控提供理论技术支撑。

由于一些猪场滥用抗生素,使得大肠杆菌耐药质粒转移扩散产生了耐药性,对抗生素的敏感性不断下降,因此,合理选用抗生素是非常有必要的;在饲料禁抗的大背景下,使用一些益生菌或中药添加剂可以降低仔猪腹泻发病率。饲料中添加益生菌可有效地调节肠道菌群。有试验证明,在仔猪出生后未吮吸母乳前饲喂乳酸杆菌能大幅降低腹泻死亡率。在生产中,可选择“小柴胡散+阿莫西林”和“双黄连+阿莫西林”来驱除寒湿和热湿。

7d后,笔者电话回访,主诉猪群基本恢复正常。随着集约化养殖业的不断发展,仔猪腹泻现象时常发生,需要高度重视,及时查明病因,精准治疗,除上面提到的方案外,还可以采取返饲的方式,将妊娠母猪暴露于病毒污染的粪便或者肠内容物,激发母猪产生乳汁免疫力;给新生仔猪灌服抗PED卵黄抗体等。预防仔猪腹泻,最重要的是要做好妊娠母猪的疫苗免疫,尤其是PEDV和E.coli疫苗的合理接种,它直接关系到初乳中的抗体水平,间接影响猪场的经济效益。

参考文献:略
作者:陈亮,张蕾,沈思思,兰世捷,苗艳,冯万宇,李丹,钟鹏,刘博超,吴宪,于辰龙/黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院
来源:《中国动物保健》2023年3月刊


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