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猪繁殖与呼吸综合征流行情况及其疫苗的研究与应用

日期:2023-03-29 11:59:10

摘 要:猪繁殖与呼吸综合征是我国养猪业危害最大的疫病之一,自我国出现高致病性猪繁殖与呼吸综合征毒株以来,猪繁殖与呼吸综合征病毒基因型演变及毒株流行特点的相关研究愈加深入。该文阐述了近几年我国猪繁殖与呼吸综合征的流行特点及其疫苗的研发与免疫应用情况。可以看出,我国现阶段流行的毒株以高致病性毒株和基因缺失株为主。疫苗的研究主要为弱毒疫苗的开发与应用,现已有基因工程疫苗生产上市,基因工程疫苗为现阶段的研究焦点,也是以后的发展方向。

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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome,PRRS),俗称蓝耳病。是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)引起的一种高度接触性传染病。自2006 年我国出现高致病性PRRS 后,该病的防控要求愈加严格,因此该文对近些年我国猪繁殖与呼吸综合征的流行趋势及其疫苗的研发与免疫情况进行了综述。


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我国PRRSV 流行优势毒株的演变


猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)最早于1887 年在美国发现,后来传播到欧洲和亚洲。1991 年荷兰学者首先分离出了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),PRRSV 为有囊膜的单股正链RNA 病毒,目前有两种血清型,为欧洲型(PRRSV1)和美洲型(PRRSV2)。欧洲型代表性毒株为LV 株,美洲型代表性毒株为VR2332 株。我国在1995 年首次报道本病,1998 年仇华吉等[1]首次在母猪出现流产的胎儿中分离出PRRSV 并命名为CH-1a。2006 年5 月至2007 年底,我国很多省份和地区暴发了高致病性PRRSV,经科学家们的研究发现,该类PRRSV 在Nsp2 基因中出现了30 个氨基酸的不连续缺失。代表毒株为JXA1,HuN4、TJ 等毒株,该病毒毒性强,传播速度块,很快成为我国主要流行的PRRS 病毒毒株。2008 年美国研究人员首次分离出一种新的毒株为NADC30,这个病毒的毒株在Nsp2 基因上有131 氨基酸不连续的缺失,但是我国并没有发现NADC30 毒株的流行。2013年,周峰等[2]在我国首先发现了一种Nsp2 基因存在不连续的393 个核苷酸缺失的类NADC30 PRRSV。2016 年以来,类NADC30 PRRSV 正逐步成为我国现阶段流行的优势毒株。可以看出,自我国首次报道本病以来,在我国部分地区猪繁殖与呼吸综合征一直存在和发生。我国临床检出以美洲株及其变异株为主。PRRSV 优势毒株的流行趋势由经典毒株向基因缺失变异株演变,高致病毒株为部分地区的优势毒株。


 02

PRRS 流行特点与趋势

近几年,PRRS 仍旧是我国猪场威胁较大的疾病。2016—2020 年,全国各地区都不同程度地开展了猪繁殖与呼吸综合征的流行病学调查与研究。该病的流行情况在各个地区也有所不同。祝闰琦等[3]在安徽地区采集疑似感染PRRSV 猪的血清、唾液、精液等416份样品检测,其中阳性样品的比率为53.6%。其中,美洲型经典毒株占19.7%,高致病性PRRSV 占44.8%,类NADC30 PRRSV 占13.0%,表明安徽地区的流行调查中的优势毒株为高致病性PRRSV;通过对广西地区疑似感染脏器1547 份进行检测,PRRSV 阳性率为29.9%,检测出1 株与类NADC30 株同源性较高,检出1 株与GM2 株同源性较高,其余均与高致病性PRRSV 同源性较高,表明江西地区以流行高致病PRRSV 为主,同时出现了类NADC30 株和GM2株新毒株的流行[4];石青青等[5]在天津地区利用RT-PCR 方法检测疑似感染PRRSV 样品,检出阳性率为40.47%,并且呈现增长趋势。类NADC30 的检出阳性率为28.74%,占整个阳性样品的71.01%,可见天津地区类NADC30 毒株已经成为PRRS 的主要流行毒株。山东地区检测493 份疑似PRRSV 样品,检出阳性率为22.5%,通过对34 份毒株的ORF5 基因核苷酸及GP5 精氨酸序列分析比较,表明类NADC30 PRRSV 可能已成为山东地区优势野毒毒株[6];赵小月等[7]采集了河南地区部分猪场的414 份脏器样品进行RT-PCR 检测,检出PRRSV 阳性率为25.48%,经过进一步的鉴定,阳性样品中检出70.48%为类NADC30 毒株,可见河南地区类NADC30 毒株为流行优势毒株。贾云飞等[8]在山西地区的散养户中采集了19 份疑似病料进行检测,阳性率为21.2%,进一步鉴定1 份为类NADC30 毒株,其他均为经典毒株。通过对我国西南4 省(四川、重庆、贵州和云南)采集292 份疑似PRRS 感染的病料样本进行检测,检出PRRSV 的阳性率为44.18%,经测序分析,类NADC30病毒株阳性检出率为70.3%、高致病性病毒株(高致病性PRRSV)阳性检出率为12.5%。可见,我国西南地区类NADC30 毒株感染率高,已成为西南地区流行的优势毒株[9]。


从以上研究可以看出,在我国部分地区高致病性毒株检出率高,为优势流行毒株,少数地区类NADC30 毒株检出率较高。由毒株的流行特点和不断演变可以看到,我国猪繁殖与呼吸综合征的免疫与防控面临着巨大的挑战。


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PRRSV 疫苗免疫研究及应用

我国自发现猪繁殖与呼吸综合征以来,疫苗的研发和应用也随着流行特点和毒株的变化不断地深入,从21 世纪初开始,疫苗研发对疾病的防控起到了非常重要的作用,控制了本病的发生和流行。随着分子生物学的高速发展,基因工程疫苗成了现如今研发的热点。


2000 年郭宝清[10]采用国内分离的CH-1a 株作为疫苗用毒株,进行转瓶培养制备了猪繁殖与呼吸综合征病毒甲醛灭活疫苗。2005 年CH-1a 株疫苗是我国国内生产的第一支商品化猪繁殖与呼吸综合征灭活疫苗。经实验证实,此疫苗首次免疫后猪体产生抗体时间短,5d 即可检测到特异性抗体,免疫后28d 抗体滴度可达到高峰且保护持续时间较长,免疫效果较好;2007 年蔡雪辉等[11]利用PRRSV CH-1a 株进行连续传代细胞培养,将毒株致弱,研发了猪繁殖与呼吸综合征活疫苗CH-1R 株,胡守萍等[12]通过对比试验得出,CH-1R 株弱毒疫苗对高致病性变异株的免疫效果好于变异性毒株灭活疫苗。因此,目前该疫苗常应用于肉用猪群猪繁殖与呼吸综合征的免疫预防,保护率相对较高的疫苗,免疫效果较好。以上是我国研发人员利用经典毒株研发的灭活疫苗和弱毒疫苗情况,自从2006 年我国发生高致病性猪繁殖与呼吸综合征以来,这些疫苗对猪场防控本病起到了很好的免疫预防作用。

2008 年以来,由于高致病性毒株的广泛流行,高致病性毒株的活疫苗成为研发的热点。田克恭[13]研发了高致病毒株JXA1-R 株活疫苗,通过临床的应用,本疫苗免疫一次后抗体有效期可长达4 个月,且无临床不良反应。2009 年,南京农业大学和瑞普(保定)生物药业有限公司共同研发了R98 株猪繁殖与呼吸综合征活疫苗,R98 株是从北美引进的PRRSV 抗体阳性的临床健康仔猪血清中分离到的,属于自然致弱美洲株。本毒株毒力稳定,对普通型猪繁殖与呼吸综合征临床保护率高,种猪群免疫应用较为广泛。田志军研制了HuN4-F112 株商品化弱毒疫苗,此疫苗株是将高致病性PRRSV 毒株HuN4 在传代细胞上进行连续性传代致弱而制成。


张洪亮等[15]将HuN4-F112 株商品化弱毒疫苗对类NADC30 PRRSV 的免疫保护效果进行了试验研究,结果表明HuN4-F112 株弱毒疫苗对类NADC30 PRRSV SD53-1603 株可以提供较好的临床保护。因此,虽然目前没有针对类NADC30 PRRSV 的商品化疫苗,该研究为评价我国现有疫苗是否对类NADC30 PRRSV具有保护效果提供了参考依据。高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TJM-F92 疫苗株(高致病性PRRSV TJM-F92)是一株自然基因双缺失疫苗,本毒株经过测序后发现在Nsp2 基因存在不连续30 个氨基酸(aa)缺失,同时还存在一段连续缺失120 个aa 的弱毒疫苗株。经研究,TJM-F92 疫苗株对猪瘟免疫应答不会产生干扰,并在多地区的养殖生产实践中得到证实。在2016 年,高致病性猪繁殖与呼吸综合征疫苗联合猪瘟二联活疫苗商品化生产(TJM-F92 株+C株),实现了PRRSV 和猪瘟联合预防[16]。2015 年,GDr180 株是广东永顺研发的商品化高致病性毒株弱毒疫苗。GDr180 株是通过在传代细胞上连续传180代后致弱,筛选出的一株免疫原性高,安全性高的良好疫苗株。接种后可使猪只获得坚强的免疫保护,抗体在体内持续时间长,保护力强。临床应用上与猪瘟疫苗同时免疫,不影响猪瘟疫苗免疫效果。


武汉中博生物在2018 年9 月研发出我国首个猪繁殖与呼吸综合征基因工程疫苗PC 株[17],此疫苗为嵌合病毒活疫苗,将猪繁殖与呼吸综合征病毒(SP株)和高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(GD 株)利用反向遗传操作技术嵌合而成。利用PC 株进行免疫可同时预防经典蓝耳病和高致病性蓝耳病,具有免疫猪不排毒、无毒力返强、安全性高等基因工程疫苗所具有的优势,有利于猪场进行猪繁殖与呼吸综合征的净化。


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小结

我国猪场自出现猪繁殖与呼吸综合征的流行以来,病毒流行的优势毒株不断发生演变和变异,从经典株变化为高致病性毒株和基因缺失毒株。为了更好地防控猪繁殖与呼吸综合征,我国科学家一直在不断地进行着疫苗的研发与应用研究。通过该文的详述可以看出,由于高致病性猪繁殖与呼吸综合征的出现,近些年很多研究人员一直致力于高致病性毒株弱毒疫苗的研发,防控高致病性猪繁殖与呼吸综合征方面取得了较好的成绩。猪繁殖与呼吸综合征病毒的不断变异,大大地增加了此病的防疫难度。现在商品化的成熟的基因工程疫苗不是很多,新型基因工程疫苗成为当前研发的热点。


猪繁殖与呼吸综合征的防控重在建立好动物传染病防控制度。猪场建立全面的生物安全体系,全面提高饲养水平,做好免疫接种,提高动物身体免疫力。基于本病对于猪养殖企业的巨大危害,猪场应根据实际情况进行猪繁殖与呼吸综合征的净化,尤其是种猪场的净化尤为重要。


参考文献:(略)


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