1 材料与方法

1.1 材料

1）试验动物：选择合作勒秀乡、迭部县旺藏乡、卓尼县扎古录镇三乡镇的12户5头以上的合作蕨麻猪养殖户家中，选择散养的45日龄的断奶蕨麻猪仔猪各20头，选择的试验仔猪胎次、饲养状况、环境条件相近，共计60头。

2）接种疫苗：猪瘟活疫苗（细胞源）批号为（2021013）购自哈尔滨维科生物技术有限公司，猪口蹄疫O型合成肽疫苗批号为（20170710）购自申联生物医药（上海）股份有限公司。

3）试验试剂：猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒（批号：20200221，规格192孔/盒），购自青岛立见诊断技术发展中心；口蹄疫O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒（批号：20200615，规格200孔/盒），购自兰州兽医研究所生物科技有限公司。

4）试验仪器：酶标仪（DNM-9606），北京普朗公司；自动洗板机（DNX-96），北京普朗公司；超纯水仪（WP-UP-YJ-20），四川优普超纯科技有限公司；超声波清洗器（SB25-12DT），宁波新芝生物科技股份有限公司；台式高速冷冻离心机（3H24RI），湖南湘仪；超低温冰箱（DW-86L338J），青岛海尔医疗有限公司；自动高压灭菌器（LDZM-80KCS-III），上海申安医疗器械厂；恒温水浴锅（HH-S8），常州国宇仪器制造有限公司。

1.2 方法

1）免疫注射方法：选取45日龄断奶仔猪60头，分为A、B、C共3组，颈部右侧肌肉注射猪瘟活疫苗（细胞源）1mL，同时同步在左侧耳根后肌肉注射口蹄疫O型灭活苗1mL进行试验。

2）免疫副反应观察：免疫接种的试验猪在注射疫苗后的1～3d内，观察并记录每头猪的免疫副反应情况，检查猪只精神、食欲、行为、体温等临床特征。

3）免疫抗体检测：试验猪注射疫苗后21、50、80、110、145和180d分别测定猪瘟、O型口蹄疫两种疫苗的免疫抗体水平，按照中国农科院兰州兽医研究所改进型口蹄疫病毒O型抗体液相阻断ELISA检测试剂盒使用说明以及猪瘟病毒ELISA抗体检测试剂盒使用说明进行操作及判断结果，观察其抗体消涨规律。

2 结果与分析

2.1 疫苗副反应调查结果

结果见表1，试验组60头中共有10头蕨麻猪出现了不同程度的免疫副反应，表现为体温升高、精神沉郁、食欲不振和腹泻，10头猪均在72h内自愈，表现为一般副反应，呈一过性。

2.2 O型口蹄疫抗体消长动态测定结果

结果见表2，3个试验组在免疫猪口蹄疫O型合成肽疫苗后产生抗体，从21d开始监测一直持续到180d，其中50～145d群体保护率一直维持在较高水平，均达到农业农村部规定的70%以上的标准，110d开始有所下降，在试验中使用了疫苗使用说明书推荐剂量免疫，可以获得较好的保护力。

2.3 猪瘟抗体消长动态测定结果

结果见表3，3个试验组在免疫猪瘟活疫苗（细胞源）后产生猪瘟抗体，从21d开始监测一直到180d，一直维持在较高水平，由此推断“同步分点注射”口蹄疫和猪瘟2种疫苗，猪瘟抗体效价不会受到影响。

3 讨论与小结

3.1 两种疫苗同步分点接种副反应较小

同步分点接种猪瘟疫苗、猪口蹄疫O型合成肽疫苗72h内，试验组出现免疫副反应的头数是：A组7头、B组5头、C组4头，分别占免疫数的35%、25%和10%，均未出现严重免疫副反应和死亡副反应，而且基本上呈一过性反应，这说明蕨麻猪本身的抵抗力强，疫苗副反应小，在临床上可以进行“同步分点”免疫注射方法。

3.2 同步分点免疫猪瘟和口蹄疫两种疫苗，试验组均得到了很好的免疫保护

首免刺激的免疫应答迅速有效，但抗体效价和群体保护率随着时间的延长有所降低。猪瘟疫苗在免疫后各个检测阶段均在要求的保护率以上，在免疫后110d（猪已经达到155日龄左右）其抗体水平依然维持较高水平，保护率达到100%，效果显著。口蹄疫的抗体水平在免疫后50d达到峰值，125日龄左右保护率达到100%。运用“同步分点”这种新的免疫方法，安全有效，免疫副反应小，可以有效地保证和提高口蹄疫、猪瘟的免疫抗体水平和质量。这种新的免疫程序进行免疫可以减少防疫人员工作量，同时能降低反复抓猪而造成的应激反应。

鉴于口蹄疫免疫1次其抗体水平产生有限。建议在运用此方法的同时，对口蹄疫在155日龄左右再实施1次强化免疫，以保证口蹄疫的免疫效果。通过蕨麻猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫抗体消涨变化的研究表明，猪口蹄疫O型合成肽疫苗免疫一次，即可确保高效价抗体维持至155d。猪口蹄疫O型合成肽疫苗具备免疫原性高，生物安全性好，免疫副反应小等优点，接种口蹄疫O型合成肽疫苗后猪群的群体保护率均较好，且抗体水平和群体保护率的时间较稳定，说明接种该疫苗效果好。在生产实践中值得普及推广。

3.3 通过对试验数据进行分析，建议蕨麻猪免疫程序如下

仔猪45日龄首免O型口蹄疫疫苗，同步另一侧注射猪瘟，在155日龄左右再实施1次O型口蹄疫和猪瘟强化免疫。此外，口蹄疫和猪瘟的防控还应该加强猪群的饲养与管理、疫苗的质量与操作等因素有关，只有这样才能有效减少蕨麻猪口蹄疫和猪瘟的发生，从而提高农牧民的收入。