传染性支气管炎是世界各国养禽业的主要经济上重要的家禽疾病之一。该病是由传染性支气管炎病毒引起的,可感染多种禽类动物发病。禽传染性支气管炎造成的经济影响包括蛋鸡产蛋量下降和蛋质量差、肉鸡生长发育迟缓、胴体重低和死亡率。尽管禽传染性支气管炎主要影响家禽的呼吸道器官,但禽传染性支气管炎病毒表现出广泛的组织趋向性,包括肾脏和生殖系统。因此,禽传染性支气管炎发病结果可能受所涉及的器官或组织以及感染病毒的病理类型或感染的禽传染性支气管炎病毒毒株的影响。因此,了解特定地区流行的禽传染性支气管炎病毒毒株的流行病学知识对于指导控制和预防非常重要。同时,以前的诊断方法,如血清学和病毒分离的检测结果不太敏感和耗时;目前的检测方法可提供高度灵敏、快速和准确的诊断结果,从而能够在尽可能短的时间内对新病毒株进行基因分型时间。本综述讨论了禽传染性支气管炎的流行病学和诊断方法,为禽传染性支气管炎的诊断和防控提供参考。 禽传染性支气管炎是由禽支气管炎病毒感染引起的一种禽常见传染病,给全世界的家禽业造成了重大的经济损失。自首次于美国北达科他州发现禽传染性支气管炎以来,禽传染性支气管炎病毒在世界各国的鸡群中被广泛的发现,尤其是在拥有大量商品化禽种群的国家。除呼吸道感染外,禽传染性支气管炎还会影响家禽的肾脏和生殖道,分别导致肾功能障碍和产蛋量减少。虽然禽传染性支气管炎最初被认为主要发生在低日龄鸡,但是,所有日龄的鸡均易感染禽传染性支气管炎病毒。禽传染性支气管炎病毒主要感染家禽的呼吸系统并引发疾病。然而,一些病毒变种和一些野外分离物可影响鸡的生殖、肾脏和消化系统。禽传染性支气管炎的临床症状因所涉及的系统以及病毒株而异。家禽被认为是禽传染性支气管炎的天然宿主,但在非家禽物种中也发现了禽传染性支气管炎病毒样冠状病毒,包括野鸡、孔雀、火鸡、鹅、鸽子、鹌鹑、鸭子和亚马逊鹦鹉。火鸡冠状病毒和禽传染性支气管炎病毒之间的抗原相似性也已得到证实。已在与家禽密切接触的人类中检测到禽传染性支气管炎抗体阳性,但尚未报告该病毒会导致人类临床疾病。所有年龄和品种类型的鸡都易受禽传染性支气管炎病毒感染,但与成年鸡相比,禽传染性支气管炎的临床症状严重程度在低日龄的小鸡中更为明显。同样,家禽对禽传染性支气管炎病毒感染的抵抗力也随着日龄的增加而增加。禽传染性支气管炎病毒通过呼吸道分泌物以及受感染家禽的粪便、飞沫传播。受污染的物体和器具可能有助于禽传染性支气管炎病毒从一个群体传播到另一个群体。通过气溶胶传播方式人工感染后在试验鸡气管、肾脏和法氏囊中检测到禽传染性支气管炎病毒,证实了该病毒可通过空气气溶胶传播。禽传染性支气管炎病毒在环境和宿主体内的持久性仍有待阐明。在家禽中,初始感染发生在哈德氏腺、气管、肺和气囊的上皮。禽传染性支气管炎的严重程度和临床特征取决于所涉及的器官或系统。呼吸系统感染可能导致临床症状有喘气、打喷嚏、和流鼻涕。受影响的家禽无精打采,羽毛竖起。其他症状可能包括体重减轻和禽舍内的家禽挤在一起。与禽传染性支气管炎感染相关的其他临床结果包括结膜炎、流泪、水肿。受感染的家禽也可能出现昏昏欲睡,有呼吸困难和不愿移动的临床表现。肾病性禽传染性支气管炎病毒毒株在肉鸡中最为常见。临床症状包括抑郁、湿便和过量饮水。生殖道感染与输卵管损伤有关,导致产蛋量和蛋质量下降。鸡蛋可能会出现畸形、粗糙的外壳或带有水样的蛋黄。若不采取有效的治疗措施,产蛋量下降不会恢复正常产蛋,从而导致高经济损失。病理剖检时肉眼观察到的病理变化包括气管黏膜和肺外支气管充血和水肿。肾病性禽传染性支气管炎病毒毒株会引起以肾脏肿胀和充血为特征的肾炎,有时伴有尿酸盐沉积的输尿管苍白。同样,感染肾病性禽传染性支气管炎病毒毒株可能导致肾脏苍白、肿胀和出现白色花纹。当生殖系统受到影响时,可能会出现腺体下输卵管炎,尤其是在严重感染的鸡中更为常见。在感染某些禽传染性支气管炎病毒毒株后的青年蛋鸡中也观察到囊性输卵管炎。禽传染性支气管炎感染由于宿主相关、病毒相关、环境、继发性细菌感染或共感染具有免疫抑制作用的病毒如传染性法氏囊病病毒可能会造成禽传染性支气管炎病毒感染的恶化结果。通常,与仅感染呼吸系统或生殖系统的菌株相比,肾病禽传染性支气管炎病毒毒株会导致更高的死亡率。传统的和新型的诊断方法已被用于诊断禽传染性支气管炎病毒感染。选择一种检测还是另一种检测取决于样品类型、检测材料和设施的可用性、检测报告时间、检测目的以及检测是在现场还是在实验室进行。3.1 禽传染性支气管炎的血清学检测方法 过去,病毒中和试验( VN) 和血凝抑制试验( HI) 等血清学检测试验被广泛用于检测和禽传染性支气管炎病毒毒株血清分型。血清学检测方法也被用于检测疫苗接种后的鸡群保护。血清型特异性抗体通常使用血凝抑制试验,即使血凝抑制试验有时的检测结果不太准确。另一方面,ELISA 检测是一种更灵敏,更容易应用于现场使用和监测疫苗接种或暴露后的抗体反应的检测方法。然而,不与常用抗血清发生交叉反应的不同禽传染性支气管炎病毒毒株血清型的出现通常使得血清学检测在对新的或新兴的禽传染性支气管炎病毒分离株进行分类时不太适用并且是非决定性。3.2 禽传染性支气管炎病毒的分离鉴定 病毒分离一直是诊断禽传染性支气管炎病毒的金标准。在疾病早期采集样本并确保正确的采样技术是成功分离禽传染性支气管炎病毒的关键。为从拭子中成功分离病毒,建议将拭子样本置于培养基或PBS 的缓冲溶液中,然后再将其运送到实验室。严格的技术要求和因素,例如病毒在鸡蛋或细胞培养物中多次传代所需的时间,限制了病毒分离作为禽传染性支气管炎病毒感染诊断方法的选择。尽管如此,不同的实验室使用不同的分离方法,如鸡胚接毒、细胞接毒和器官接毒。3.3 免疫组织化学法 免疫过氧化物酶和免疫荧光是两种重要的组织化学方法,用于检测和确认来自受感染组织和/ 或细胞的禽传染性支气管炎病毒抗原。这些方法基于抗原- 抗体反应。免疫组织化学法已成功用于定位组织样本中的禽传染性支气管炎病毒抗原。间接免疫荧光检测是最常用的荧光技术。3.4 分子生物诊断方法 鉴于其灵敏度提高和报告时间缩短,分子诊断分析,如RT-PCR、实时PCR、限制性片段长度多态性(RFLP)和基因组测序,几乎取代了传统的血清学和禽传染性支气管炎病毒诊断的病毒培养方法。3.5 电子显微镜观察法 电子显微镜根据冠状病毒的形态特征提供了一种直接检测和鉴定生物样本中鸡传染性支气管炎病毒的方法。透射电子显微镜(TEM)也是一种有用的工具,它可以使受感染细胞中的病毒样颗粒可视化。然而,这种方法通常用于了解病毒附着和进入细胞,但不是特定的诊断检测。由于目前禽传染性支气管炎在我国大部分地区的鸡群中均有流行的情况,一定要根据当地禽传染性支气管炎的流行情况进行针对性的防控,其中疫苗接种是禽传染性支气管炎防控方面最有效也是最重要的手段,因此应根据禽传染性支气管炎在当地的流行情况制定合理的疫苗接种计划,防止鸡群暴发大规模的禽传染性支气管炎。此外,对于引进的鸡苗和种蛋等一定要经过检疫,无禽传染性支气管炎的鸡方可进行饲养,防止引入带毒鸡造成严重的经济损失。在鸡群接种疫苗后,要定期检测鸡群疫苗接种效果,确保疫苗接种的有效性。在日常养殖过程中,要提高对鸡群的监管意识,对疑似患禽传染性支气管炎的病鸡或已出现临床症状的鸡及时淘汰处理,同群鸡进行针对性的预防性治疗,避免鸡群由于禽传染性支气管炎病毒感染造成的损失。在诊断禽传染性支气管炎时应注意与其他有相似症状的疾病,如禽流感、传染性鼻炎等进行区分,最终诊断结果也应在实验室检测确定后方可确诊处理。自从二十世纪30 年代首次发现禽传染性支气管炎病毒以来,越来越多的新的禽传染性支气管炎病毒血清型被发现。缺乏有效的诊断方法和疫苗可以轻松应对多种禽传染性支气管炎病毒血清型造成的威胁,部分原因归咎于禽传染性支气管炎疾病造成的严重经济损失。病毒中和和病毒分离等常规检测方法已被广泛使用,但由于灵敏度和特异性以及时效性,这些检测方法已逐渐被新的灵敏和特异检测方法所取代,例如RT-PCR、RFLP 和qRT-PCR,能够快速进行基因分型和鉴定新的禽传染性支气管炎病毒毒株。相信在未来,会有更加高效和准确的禽传染性支气管炎病毒检测方法被研制出来。