一. 光学显微镜的结构

以下介绍光学显微镜结构的主要部分：

目镜：将物镜放大的实像进一步放大成一个起立的虚像，其作用相当于一个放大镜，但是目镜并不增加光学显微镜的分辨力。一般光学显微镜备有几个放大倍数不同的目镜，放大倍数会刻在目镜边缘，如5x、10x和15x等，临床最常用放大10x的目镜。

物镜：多数复式显微镜有3个或4个物镜，每个物镜的放大率都不同，多数物镜的放大倍数包括：4x（扫描）、10x（低倍）、40x（高倍）和100x（油镜）。物体的放大倍数为目镜的放大倍数乘以物镜的放大倍数，如物体放置在4x的物镜下，用10x目镜观察，镜下的放大倍数为40x [（4x）X（10x）]。

聚光器：作用是会聚由反射镜反射来的光线，增加标本的照明，升降聚光器，可调节照明强度和改变对比度。

光圈环：由十余片金属薄片组成，中心部分形成圆孔，通过旋转光圈环，可调节圆孔的大小，由此调节光线的强弱。

粗准焦螺旋和细准焦螺旋：调节物镜与标本之间的距离，使物镜的焦点对准标本，得到更清晰的图像，粗准焦螺旋旋转一周可使镜筒升降20mm，细准焦螺旋每旋转一周可使镜筒升降0.1mm或更小。

二. 光学显微镜的使用

1、调整合适的座椅高度和显微镜的摆放位置

对于长时间需要观看显微镜的临床工作者来说，这一点非常重要，主要是保证自己身体健康的情况下也能感受到工作的舒适。

合适的座椅高度：显微镜的摆放位置：1）显微镜应该长期放置在一个平坦、不需要挪动和不被震动的地方，应该远离离心机和振荡器；2）周围有足够的空间放置玻片和参阅书籍。

2. 使用光学显微镜的步骤

1）调节粗准焦螺旋，将载物台调节到最低点，打开光源，检查目镜、物镜和聚光器镜头，必要时进行清洁；

2）将载玻片放置在载物台上，固定在样本固定器中间，旋转物镜转换器，4x物镜下扫查观察区域，获得样本的整体印象；

3）旋转物镜转换器，在10x物镜下对准观察物，注意不要直接旋转物镜；

4）在目镜下观察，调节目镜的距离，使双孔目镜观测的区域相近，直到双眼观察的视野相同；

5）调节聚光器、光圈和粗准焦螺旋，使观察物位于焦点位置，旋转细准焦螺旋直到样本清楚聚焦；

6）转换40x物镜，调节粗细准焦螺旋对样本进行聚焦，调节聚光器和光圈，使细节观察更为清晰；

7）需要油镜观察细胞结构时，物镜转换到4x物镜下，对样本聚焦，滴加一滴显微镜浸油，直接旋转到100x油镜下，调节细准焦螺旋聚焦样本，调节聚光器和光圈，使样本观察更为清晰；

8）使用完毕后，关掉电源或将光亮调到最小，将载物台调至最低位置，旋回4x物镜到原来的位置，拿走载玻片，必要时用镜头纸擦拭100x镜头。

四. 临床检验中使用光学显微镜的注意事项

1）转换物镜时旋转物镜转换器，而不是直接转动物镜，避免滑脱物镜导致损伤；

2）不可将高倍镜镜头与显微镜镜油接触，接触后及时用清洁剂擦拭干净；

3）观察结束后先将油镜转换成低倍镜下，再拿走载玻片，避免损伤镜头，及时用擦镜纸擦拭油镜镜头；

4）显微镜使用结束后，关闭电源或将光亮调至最小，不用时关闭电源，盖好防尘罩。

五. 总结

临床检验过程中，需要对样本进行显微镜观察，因此以下为样本检验的显微镜操作：

1.血细胞、细胞学、体腔液和分泌物染片

1）低倍镜下扫查，调节粗细准焦螺旋，找到观察区域；

2）转换高倍镜，调低聚光器，调节光圈找到合适的光强度，旋转细准焦螺旋使样本更清晰；也可滴加一滴镜油盖上盖玻片，在高倍镜下也能清晰的观察细胞（见图2）；

3）转换低倍镜，滴加镜油，旋转转换器到油镜下，调高聚光器，使贴近于玻片，将光圈调大，旋转细准焦螺旋，清晰观察样本（见图3）；

4）观察结束，关闭电源或调低光亮至最小，调低载物台或旋转到低倍镜，拿走玻片，擦拭油镜镜头。

图2 两图均为高倍镜下的血细胞，左图为滴加一滴镜油，盖上盖玻片后显微镜下观察的结果；右图为未滴加镜油观察的结果（其他条件一致）。

图3 左图为犬皮肤肥大细胞瘤油镜下观察的结果；右图为犬血涂片油镜下观察的结果（升高聚光器贴近于玻片）。

2.粪便、尿液、皮肤活片和染片

粪便、尿液和皮肤活片低倍镜下扫查，调节粗细准焦螺旋，找到观察区域，调低聚光器，增加对比度，减少光圈，降低光强度，转换高倍镜下观察（注意盖上盖玻片，避免污染镜头），调节细准焦螺旋，清晰观察样本（见图4）；

粪便、尿液和皮肤涂片低倍镜下扫查，调节粗细准焦螺旋，找到观察区域，旋转到高倍镜下，仔细扫查样本，需要油镜下观察时，调高聚光器，贴近于玻片，增大光圈，增强光强度，滴加镜油，转换到油镜下调节细准焦螺旋，清晰观察样本。

图4 两图均为粪便的活片，左图为降低聚光器显微镜结果；右图为未降低聚光器的显微镜结果。